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目 录1

第一章引言1

第二章免疫组织化学技术5

一、免疫组化染色方法的基本分类6

（一）直接法7

（二）间接法7

（三）非标记抗体桥法（四层法）8

（四）改良非标记桥法或PAP法（三层法）8

（五）ABC法9

二、免疫组化染色步骤10

（一）免疫荧光组织染色法10

（二）免疫酶组织染色法11

（三）醋酸缓冲液13

（一）试验计划14

（二）抗体稀释度14

三、免疫组化染色基本技术操作和注意事项14

（三）滴加抗体在玻片上的技术18

（四）PBS洗涤法19

（五）湿盒孵育技术20

（六）抗体孵育时间20

（七）蛋白酶消化处理21

（八）光镜控制显色方法22

四、对照组和染色结果的评价23

五、固定法和切片制作技术30

（一）固定法31

（二）包埋和切片方法35

六、双重标记染色法37

（一）单酶法38

（二）双酶法40

七、免疫组化染色在电镜观察、培养细胞和43

整块组织染色方面的技术43

（一）电子显微镜观察标本的免疫组化技术（免疫电镜技术）43

（二）培养细胞的免疫组化染色47

（三）整块组织免疫组化染色49

第三章免疫组织化学技术在外科病理学中的50

应用50

一、淋巴组织及其肿瘤51

（一）正常淋巴组织的免疫组化染色51

（二）恶性淋巴瘤的免疫组化染色特点61

（一）基本原理63

二、居间纤维分类法63

（二）免疫组化技术要点66

（三）居间纤维分类法用例68

三、酶和激素81

四、肿瘤胚胎抗原84

五、肿瘤特异性标记抗原的探索86

六、免疫组化技术在病理诊断中的用例87

第四章免疫组织化学技术在肾和皮肤病理方89

面的应用89

一、免疫组化技术对肾病的诊断价值89

（一）免疫复合物肾小球病91

（二）肾病主要的综合征97

（四）免疫荧光染色对肾小管间质性肾病的诊断价值100

（三）全身性轻链病（轻链肾病或轻链肾小球硬化）100

二、免疫荧光染色技术对皮肤病的诊断价值102

（一）结果评定注意事项103

（二）细胞间反应103

（三）基底膜带（BMZ）反应104

（四）血管反应106

（五）表皮结构内能结合循环抗体的抗原106

（六）其他107

第五章内耳免疫组织化学研究方法110

一、方法学111

（一）石蜡包埋切片法111

（二）冰冻超薄切片法112

（三）Epon等材料包埋后切片法114

（四）塑料包埋不脱钙颞骨切片法117

二、免疫组化技术对内耳自身免疫病的研究119

（五）快速冰冻和冻干切片法119

（一）设计这项研究的依据120

（二）建立耳免疫病动物模型的方法120

（三）主要研究结果121

三、内耳细胞支架蛋白分布的免疫组化研究124

附录A 常用试剂配方129

一、缓冲液129

（一）磷酸缓冲液（PBS）129

（二）Tris缓冲液130

（二）4％多聚甲醛131

（一）10％中性缓冲甲醛液131

二、固定液配方131

（三）戊二醛132

（四）Karnovsky氏固定液132

（五）B—5固定液132

（六）Zenker氏固定液132

（七）Bouin氏固定液133

（八）甲醛—醋酸—酒精（FAA）固定液133

（九）Clarke氏固定液134

（十）Carnoy氏固定液134

（十一）Heidenhain s Susa固定液134

（十二）Rossman氏固定液134

（十三）醋酸—甲醛—盐液134

（二）3，3’一四盐酸二氨基联苯胺（DAB）135

四、对比染色用染料135

三、酶作用底物的配制方法135

（一）3氨基9乙基咔唑（AEC）135

五、封固剂136

六、载玻片涂粘固剂法137

七、抗体稀释计算法138

附录B美国部分商品抗体和试剂目录140

一、Vector Laboratories公司140

二、Becton Dickinson Monoclonal Center公司143

三、Ortho Diagnostic Systems公司147

四、DAKO Corporation公司148

五、其他152

参考文献155